摘要 目的:研究妇炎栓抗炎､镇痛､刺激性｡方法:以小鼠耳肿胀实验(妇炎栓剂量为4.5､3.0､1.5g/kg)､小鼠足跖肿胀实验(测定时间点为5min与0.5､1､4､6h)研究妇炎栓的抗炎作用;以小鼠扭体反应实验(妇炎栓剂量为4.5､3.0､1.5g/kg)研究妇炎栓止痛作用;以家兔阴道黏膜刺激实验研究妇炎栓的阴道刺激性(妇炎栓剂量为1.0g/只,每天1次,连续1周)｡结果:4.5､3.0､1.5g/kg剂量下,妇炎栓可抑制小鼠的耳肿胀､减少小鼠扭体反应次数;3.0g/kg剂量下,给药0.5~6h时妇炎栓可抑制小鼠足跖肿胀;对家兔阴道无刺激性｡结论:妇炎栓具有较好的抗炎和止痛作用;对家兔阴道无刺激性,理论上可认为阴道给予妇炎栓较安全｡
关键词：妇炎栓;药效学;小鼠;家兔
慢性妇科炎症已成为威胁妇女健康的常见病,其患者发病年龄范围广,且病情复杂､治疗难度大､易复发[1];临床表现主要为腹痛､腰痛､腹泻､尿急､尿频､尿痛等｡西医治疗常通过现代化检验技术明确病变部位及病因后以杀菌为主,但疗效不佳,有效率仅为35.38%[2]｡中医认为妇女下生殖道炎性疾病属于“带下病”范畴,治疗以“热燥湿､活血､消肿祛痛”为主,常予阴道纳药｡妇炎栓为临沂市肿瘤医院院内制剂,由苦参､黄柏､龙葵､冰片等药物组成,具有清热燥湿､活血､消肿止痒之功效｡经2年来对妇科宫颈炎､阴道炎等疾病的临床应用显示,总有效率为92.1%｡妇炎栓良好的临床疗效已得到证实,但缺乏实验数据支持｡为验证其疗效及给药的安全性,笔者进行了部分动物药效学研究,现报道如下｡
1材料
1.1仪器
BT214D型电子天平(德国Sartorius公司);E0561型千分尺[力易得格林利工具(上海)有限公司]｡
1.2药品与试剂
阿司匹林片(山东鲁抗辰欣药业有限公司,批号:1110262022,规格:25mg/片);消炎痛栓(湖北东信药业有限公司,批号:140102,规格:100mg/枚);妇炎栓(医院自制,批号:20130611,规格:5.0g/粒);蛋清(均笔者自购新鲜鸡蛋中获取);二甲苯､乙醚､二甲苯､醋酸为分析纯,明胶､甘油为药用级,水为离子交换水｡
1.3动物
SPF级ICR小鼠140只,♀♂兼用,体质量18~22g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[动物使用许可证号:SCXK(鲁)2012-0001]｡实验期间固体饲料饲养,自由饮水｡SPF级新西兰兔12只,♀(无孕),体质量2.0~2.5kg,由济南西岭角养殖繁育中心提供[实验动物使用许可证号:SCXK(鲁)2010-0005]｡
2方法
2.1实验药液､栓的制备
2.1.1妇炎栓药液取妇炎栓10粒精密称量后放于烧杯中,加水适量,置40℃水浴中,加温溶解后,精密配成1ml︰200mg药液,40℃贮藏,备用｡实验时按每只小鼠给药量量取药液,并加水稀释至0.6ml给药｡
2.1.2阿司匹林药液取阿司匹林片100片研磨成极细粉,加水适量,精密制备成1ml∶10mg混悬液备用｡实验时先搅拌阿司匹林药液3min后,并在不断搅拌下量取药液给药｡
2.1.3妇炎栓取妇炎栓10粒放于烧杯并置于40℃水浴中,加温融熔,每次称取1g注入直径0.6cm､高2cm圆柱体模具中,凝固后取出即可,得直径约为0.6cm､高约为1.5cm的圆柱
体药栓｡
2.1.4空白栓取甘油明胶10g放于烧杯并置于40℃水浴中,加温融熔,每次称取1g注入直径0.6cm､高2cm圆柱体模具中,凝固后取出即可,得直径约为0.6cm､高约为1.5cm的圆柱体空白栓｡
2.1.5空白栓､消炎痛栓､妇炎栓融熔液分别取3种栓剂各200g,放入烧杯中水浴锅40℃加温至完全融熔,(35±0.5)℃保温,备用｡
2.2小鼠耳廓肿胀实验[3-5]
50只♀♂小鼠随机均分为5组,即模型(等容去离子水)组､阿司匹林(0.2g/kg)组与妇炎栓高､中､低剂量(4.5､3.0､__1.5g/kg)组｡ig给药,每天1次,连续5d｡末次给药2h后,ip乙醚以麻醉小鼠,在小鼠右耳的前后面涂布致炎剂二甲苯(0.02ml/只),左耳不作任何处理｡4h后将小鼠麻醉处死,剪下左右耳用9mm直径打孔器分别在同一部位打耳廓,用分析天平称定质量,计算耳肿胀度与耳肿胀抑制率｡耳肿胀度=右耳质量-左耳质量;耳肿胀抑制率(%)=(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度×100%｡
2.3小鼠足跖肿胀实验
40只♂小鼠随机分为模型组､空白栓组､消炎痛栓组与妇炎栓组｡致炎前,将小鼠置于(35±2)℃､深1cm的生理盐水中,在5min与0.5､1､4､6h时,用千分尺测量小鼠右足跖厚度,测3次,取均值｡取小鼠右足跖中心点,sc10%蛋清溶液0.05ml以复制小鼠足跖肿胀模型｡致炎后,将模型组小鼠放入(35±2)℃､深1cm的生理盐水溶液中,将空白栓组､消炎痛栓组､妇炎栓组小鼠分别放入(35±2)℃､长1cm空白栓､消炎痛栓､妇炎栓的融熔液中,按上述时间点和测量方法再次测量,计算足跖肿胀度｡足跖肿胀度=致炎后小鼠足跖肿胀厚度-致炎前小鼠足跖肿胀厚度｡
2.4小鼠扭体反应实验[6]
取50只♀小鼠(无孕)随机均分为5组,即模型(等容去离子水)组､阿司匹林(0.1g/kg)组与妇炎栓高､中､低剂量(4.5､3.0､1.5g/kg)组｡ig给药,每天1次,连续5d｡末次给药2h后,ip给予小鼠0.6%醋酸,0.2ml/只,观察15min内小鼠扭体反应的次数(扭体反应表现为小鼠腹部内凹､躯干与后腿伸张､臀部抬高),计算抑制率｡抑制率(%)=(模型组扭体次数-给药组扭体次数)/模型组扭体次数×100%｡
2.5家兔阴道黏膜刺激实验
12只♀家兔(无孕)随机均分成3组,即模型(等容去离子水,ig)组､空白栓(等量空白栓,阴道给药)组､妇炎栓(1g/只,阴道给药)组｡每天17:00时给药1次,给药后固定4h,连续1周｡末次给药2h后处死家兔,取出阴道组织,观察有无充血､肿胀､淤血､变性､溃疡等现象,并进行病理组织学检查｡局部黏膜刺激分级评分标准见表1[7]｡
表1局部黏膜刺激分级评分标准
2.6统计学方法
采用SPSS13.0软件处理实验数据｡各组数据均为计量资料,数据以x±s表示,采用LSD检验进行分析｡P<0.05为差异有统计学意义｡
3结果
3.1各组小鼠耳肿胀度测定结果
与模型组比较,阿司匹林组与妇炎栓高､中､低剂量组小鼠耳肿胀度减少,差异有统计学意义(P<0.01),抑制率分别为45.10%､56.35%､41.25%､27.38%｡各组小鼠耳肿胀度测定结果见表2｡
3.2各组小鼠足跖肿胀度测定结果
与模型组比较,空白栓组小鼠各时间点足跖肿胀度变化不大,差异无统计学意义(P>0.05);消炎痛栓组与妇炎栓组给药0.5､1､4､6h后小鼠足跖肿胀度减少,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)｡各组小鼠足跖肿胀度测定结果见表3｡
表2各组小鼠耳肿胀度测定结果(x±s,n=10)
表3各组小鼠足跖肿胀度测定结果(x±s,n=10,cm)
3.3各组小鼠扭体次数测定结果
与模型组比较,阿司匹林组与妇炎栓高､中､低剂量组小鼠扭体次数减少,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),抑制率分别为65.20%､43.16%､37.96%､35.18%｡各组小鼠扭体次数测定结果见表4｡
表4各组小鼠扭体次数测定结果(x±s,n=10)
3.4各组家兔阴道黏膜刺激评分结果
模型组､空白栓组与妇炎栓组家兔阴道黏膜刺激评分分别为0､0.25､0.25,表明妇炎栓无刺激性｡各组家兔阴道黏膜刺激评分结果见表5｡
表5各组家兔阴道黏膜刺激评分结果
4讨论
中医认为慢性妇科炎症辨证主要为体内湿热长久滞排,气滞血瘀,寒湿瘀滞,从而导致妇科炎症｡本病治疗以除湿为主｡妇炎栓组方黄柏具有清热燥湿､泻火､解毒之功效｡现代药理学证明,黄柏具有抗病原微生物､降压､肌肉松弛等作用,为主药;配用苦参清热燥湿､杀虫,龙葵清热解毒､活血消肿,冰片散郁火､开窍醒神､消肿止痛等作用[8]｡诸药合用共奏清热燥湿､活血､消肿､止痛､止痒之功效｡由上述可知妇炎栓符合中医对本病治则｡
慢性妇科炎症反应非常明显,如果得不到有效治疗,会使身体长时间处于炎症的侵害环境中,对免疫功能､新陈代谢以及内分泌系统都会产生不良的影响,对身体健康危害极大｡因此,药物抗炎作用非常重要｡为此,笔者对妇炎栓进行小鼠ig给药和外用给药的非特异性炎症模型抗炎实验｡结果表明,妇炎栓对小鼠二甲苯所致耳肿胀和小鼠足跖肿胀有较强抗炎作用｡
疼痛也是慢性妇科炎症临床症状主要表现之一,为验证妇炎栓的镇痛作用,笔者采用化学刺激法中的小鼠扭体法,刺激剂为醋酸溶液｡该法具有敏感､简便､重复性好特点[9-11],但对实验室温度要求严格:室温宜恒定于20℃为宜;温度较低或较高时,小鼠扭体次数会减少甚或不扭体[12]｡本研究表明,妇炎栓对醋酸溶液所致小鼠疼痛有一定镇痛作用｡
同时,家兔阴道黏膜刺激实验证明了妇炎栓无刺激性｡
综上,妇炎栓具有抗炎､止痛作用,且阴道给药较安全｡但黏膜刺激性实验样本量少,建议临床使用时在安全性方面注意继续观察｡
参考文献
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