精液在体外处理过程中需要注意的问题。

2.1精子离心损伤。

离心是精液处理中常用的步骤之一。不可否认，离心会对精子造成一定的损害。根据Aitken的报告，精子离心可以使活性氧物质急剧增加，人类精子膜中含有大量的不饱和脂肪酸，在活性氧的作用下容易过氧化，导致细胞膜流动性降低或丧失。有缺陷的精子是ROS的主要来源。异常精子产生的高浓度ROS可以使正常，损伤异常精子细胞膜。如果先将液化精液上游，再将上游到培养液中的活性精子离心，ROS的产生可以大大降低，这种方法的受精效果已经得到报道的证实。Mortimer还认为，精子离心后使用上游方法可能是受精失败的原因。

2.2缩短精液收集至精液处理，精液处理至授精时间。

在精液体外处理过程中洗涤精液时，去能因子被去除，可以使精子获得能量。获得能量的精子，特别是形态正常、活力好的精子，容易发生顶体反应。据文献报道，25%的精子在培养液中孵化2.5小时后自发发生顶体反应，而活力差的精子在孵化6小时后只有15%发生顶体反应[10]。Yavas等。[11]研究在HMG促排卵人工授精时，将精液处理时间延迟30~60min或将精液收集延迟至人工授精90min~2h，可降低妊娠率。从精子提取到精液处理时间的延长增加了精液中ROS对精子活力的损害。精液处理到人工授精的延长可能会导致培养液中葡萄糖和果糖能量的耗尽，使精子在人工授精后无法到达输卵管受精的地方，影响受精能力。因此，在实施辅助生殖技术时，注意不要过早采集精液，处理精液后及时进行人工授精或体外受精，尽量缩短精子在体外环境中的时间。

精液处理是辅助生殖技术的重要一步，其目的是选择成熟、活跃和受精的精子。精子优化的方法很多，各有优缺点。每个实验室都应该探索自己的解决方案。随着生殖医学的发展，人们对精子的认识有了很大的进步，但在很多方面还有待进一步研究。相信随着对精子认识的深化和生殖医学界同仁对精液体外处理方法的研究总结，精液体外处理技术将不断完善，从而促进辅助生殖技术的进一步发展。